Análise do sorotipo e dos genes para mutacinas em streptococcus mutans isolados de pré-escolares com diferentes experiências de cárie
RODRIGUES, M.R.; MACIEL, S.M.; FERREIRA, F.B.A.; PIOVEZAN, A.; PIERALISI, F.J.S.; POLI-FREDERICO, R.C. Análise do sorotipo e dos genes para mutacinas em streptococcus mutans isolados de pré-escolares com diferentes experiências de cárie. Cienc Odontol Bras 2008 out./dez.; 11 (4): 40-46
Os objetivos dessa pesquisa foram avaliar a freqüência dos sorotipos c, e e f e os genes para as mutacinas I, II, III e IV pela reação em cadeia da polimerase (PCR) dos S. mutans isolados de pré-escolares sem e com história de cárie dentária.
O Streptococcus mutans (SM) é considerado o principal agente etiológico da cárie dentária em humanos e fatores de virulência tais como a composição de sua superfície celular (sorotipo) e a produção de bacteriocinas (mutacinas) têm sido investigados em relação à sua cariogenicidade. Linhagens de S. mutans são classificadas dentro de três sorotipos (c, e e f) e a especificidade sorológica é definida pelo polissacarídeo ramnose-glicose (RGP) presente em sua parede celular. A maioria dos indivíduos é colonizada com somente um sorotipo de S. mutans. Suspeita-se que o sorotipo c deva ser o progenitor dos outros sorotipos. As linhagens com sorotipo e e f devem ter sido originadas a partir de uma mutação pontual no loco determinante do sorotipo c ou uma deleção de uma porção deste loco.
A classificação das linhagens produtoras de mutacina baseadas na sua atividade bactericida, sensibilidade para outras ou para a própria mutacina produzida e presença de plasmídios, divide as mutacinas em quatro tipos I, II, III e IV. Os genes estruturais dos prepropeptídeos de mutacinas I, II, III e IV (mutA) foram seqüenciados.
As mutacinas podem apresentar um importante papel biológico na regulação e composição do biofilme dental, tanto na atividade de sinergismo ou antagonismo, sugerindo que o largo espectro de mutacinas pode ser mais importante na colonização e estabilização das espécies cariogênicas, mantendo e estabelecendo nichos e atividade microbiana altamente complexa. Talvez esse componente explique por que uma vez que S. mutans tornem-se estabelecidos, eles são dificilmente eliminados da microbiota bucal.
A população de estudo consistiu de 20 pré-escolares de 4 e 5 anos de idade, pertencente a 11 Centros de Educação Infantil (CEMEIs) da cidade de Londrina-PR.
Os resultados do estudo apresentaram que a totalidade dos isolados dos pré-escolares sem cárie foi apenas o sorotipo c, enquanto que dois de 10 (20%) isolados dos pré-escolares com história de cárie tinham ambos os sorotipos c e f. O sorotipo e não foi identificado nas amostras analisadas. No grupo livre de cárie, a PCR com o primer para o gene da mutacina IV revelou que quatro de 10 (40%) linhagens foram positivas para esta mutacina e seis de 10 (60%) dos isolados apresentaram os genes para a mutacina II.
A PCR para o gene da mutacina II mostrou que 80% das linhagens foram positivas no grupo dos pré-escolares com história de cárie, e os amplicons da mutacina IV revelou que 70% das linhagens abrigavam esses genes. Entretanto, não foram identificadas diferenças significantes no número de linhagens positivas que abrigavam os genes para as mutacinas II e IV quando se comparou os isolados de S. mutans nos grupos livre de cárie e com história desta doença. Em nenhum isolado de S. mutans dos pré-escolares foi encontrado os genes para as mutacinas I e III.
Os achados desse artigo mostraram predominância do sorotipo c, seguida do sorotipo f e ausência do sorotipo e. Em função de que a produção de mutacina pelo S. mutans pode favorecer sua instalação, sua colonização e aumentar o risco de cárie, foi investigado nesta pesquisa a freqüência dos genes para mutacinas em linhagens de S. mutans isoladas de pré-escolares com diferentes experiências de cárie dentária.
Portanto, conclui-se que os resultados mostraram que as linhagens isoladas de S. mutans de pré-escolares com história de cárie apresentaram múltiplos sorotipos (c e f) e maior proporção dos genes para as mutacinas II e IV, havendo correlação positiva entre o número de linhagens positivas que abrigavam os genes para estas mutacinas e o sorotipo nos pré-escolares com cárie.
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